శిలీంద్ర సంహారిణి అనుబంధం ఒంటరి మాసన్ తేనెటీగలలో నికర శక్తి లాభం మరియు సూక్ష్మజీవుల వైవిధ్యాన్ని తగ్గిస్తుంది.

Nature.comని సందర్శించినందుకు ధన్యవాదాలు.మీరు ఉపయోగిస్తున్న బ్రౌజర్ సంస్కరణకు పరిమిత CSS మద్దతు ఉంది.ఉత్తమ ఫలితాల కోసం, మీరు మీ బ్రౌజర్ యొక్క క్రొత్త సంస్కరణను ఉపయోగించాల్సిందిగా మేము సిఫార్సు చేస్తున్నాము (లేదా Internet Explorerలో అనుకూలత మోడ్‌ని నిలిపివేయండి).ఈ సమయంలో, కొనసాగుతున్న మద్దతును నిర్ధారించడానికి, మేము స్టైలింగ్ లేదా జావాస్క్రిప్ట్ లేకుండా సైట్‌ను ప్రదర్శిస్తున్నాము.
చెట్టు పండ్ల పుష్పించే సమయంలో శిలీంద్రనాశకాలు తరచుగా ఉపయోగించబడతాయి మరియు క్రిమి పరాగ సంపర్కాలను బెదిరించవచ్చు.ఏది ఏమైనప్పటికీ, నాన్-తేనెటీగ పరాగ సంపర్కాలు (ఉదా., ఒంటరి తేనెటీగలు, ఓస్మియా కార్నిఫ్రాన్స్) పుష్పించే సమయంలో ఆపిల్‌లపై సాధారణంగా ఉపయోగించే సంపర్క మరియు దైహిక శిలీంద్రనాశకాలకు ఎలా స్పందిస్తాయి అనే దాని గురించి చాలా తక్కువగా తెలుసు.ఈ జ్ఞాన అంతరం సురక్షితమైన సాంద్రతలు మరియు శిలీంద్ర సంహారిణి చల్లడం యొక్క సమయాన్ని నిర్ణయించే నియంత్రణ నిర్ణయాలను పరిమితం చేస్తుంది.మేము రెండు కాంటాక్ట్ శిలీంద్రనాశకాలు (క్యాప్టాన్ మరియు మాంకోజెబ్) మరియు నాలుగు ఇంటర్లేయర్/ఫైటోసిస్టమ్ శిలీంద్రనాశకాలు (సిప్రోసైక్లిన్, మైక్లోబుటానిల్, పైరోస్ట్రోబిన్ మరియు ట్రైఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్) ప్రభావాలను అంచనా వేసాము.లార్వా బరువు పెరుగుట, మనుగడ, లింగ నిష్పత్తి మరియు బ్యాక్టీరియా వైవిధ్యంపై ప్రభావాలు.క్షేత్ర వినియోగం (1X), సగం మోతాదు (0.5X) మరియు తక్కువ మోతాదు (0.1X) కోసం ప్రస్తుతం సిఫార్సు చేయబడిన మోతాదు ఆధారంగా పుప్పొడిని మూడు మోతాదులలో చికిత్స చేసే దీర్ఘకాలిక నోటి బయోఅస్సేని ఉపయోగించి మూల్యాంకనం నిర్వహించబడింది.మాంకోజెబ్ మరియు పైరిటిసోలిన్ యొక్క అన్ని మోతాదులు శరీర బరువు మరియు లార్వా మనుగడను గణనీయంగా తగ్గించాయి.అత్యధిక మరణాలకు కారణమైన శిలీంద్ర సంహారిణి అయిన మాంకోజెబ్ యొక్క లార్వా బాక్టీరియోమ్‌ను వర్గీకరించడానికి మేము 16S జన్యువును క్రమం చేసాము.మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన పుప్పొడిపై తినిపించిన లార్వాలో బ్యాక్టీరియా వైవిధ్యం మరియు సమృద్ధి గణనీయంగా తగ్గినట్లు మేము కనుగొన్నాము.మా ప్రయోగశాల ఫలితాలు పుష్పించే సమయంలో ఈ శిలీంద్రనాశకాలలో కొన్నింటిని పిచికారీ చేయడం ముఖ్యంగా O. కార్నిఫ్రాన్స్ ఆరోగ్యానికి హానికరం అని సూచిస్తున్నాయి.ఈ సమాచారం పండ్ల చెట్ల రక్షణ ఉత్పత్తుల యొక్క స్థిరమైన ఉపయోగం గురించి భవిష్యత్తు నిర్వహణ నిర్ణయాలకు సంబంధించినది మరియు పరాగ సంపర్కాలను రక్షించే లక్ష్యంతో నియంత్రణ ప్రక్రియలకు ఆధారం.
ఒంటరి మాసన్ బీ ఓస్మియా కార్నిఫ్రాన్స్ (హైమెనోప్టెరా: మెగాచిలిడే) జపాన్ నుండి 1970ల చివరలో మరియు 1980ల ప్రారంభంలో యునైటెడ్ స్టేట్స్‌కు పరిచయం చేయబడింది మరియు అప్పటినుండి నిర్వహించబడే పర్యావరణ వ్యవస్థలలో ఈ జాతులు ముఖ్యమైన పరాగ సంపర్క పాత్రను పోషించాయి.ఈ తేనెటీగ యొక్క సహజసిద్ధమైన జనాభా యునైటెడ్ స్టేట్స్‌లోని బాదం మరియు ఆపిల్ తోటలను పరాగసంపర్కం చేసే తేనెటీగలను పూర్తి చేసే దాదాపు 50 రకాల అడవి తేనెటీగలలో భాగం.మాసన్ తేనెటీగలు అనేక సవాళ్లను ఎదుర్కొంటాయి, వీటిలో ఆవాసాల ఫ్రాగ్మెంటేషన్, వ్యాధికారకాలు మరియు పురుగుమందులు ఉన్నాయి3,4.పురుగుమందులలో, శిలీంద్రనాశకాలు శక్తిని పెంచడం, ఆహారం తీసుకోవడం మరియు శరీర కండిషనింగ్ 6,7 తగ్గిస్తాయి.మాసన్ తేనెటీగల ఆరోగ్యం నేరుగా ప్రారంభ మరియు ఎక్టోబాక్టిక్ సూక్ష్మజీవులచే ప్రభావితమవుతుందని ఇటీవలి పరిశోధనలు సూచిస్తున్నప్పటికీ, బ్యాక్టీరియా మరియు శిలీంధ్రాలు పోషకాహారం మరియు రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలను ప్రభావితం చేయగలవు, మాసన్ తేనెటీగల సూక్ష్మజీవుల వైవిధ్యంపై శిలీంద్ర సంహారిణి యొక్క ప్రభావాలు ఇప్పుడే ప్రారంభమయ్యాయి. చదువుకున్నాడు.
యాపిల్ స్కాబ్, చేదు తెగులు, గోధుమ తెగులు మరియు బూజు తెగులు వంటి వ్యాధులకు చికిత్స చేయడానికి పుష్పించే ముందు మరియు సమయంలో వివిధ ప్రభావాల (కాంటాక్ట్ మరియు దైహిక) శిలీంద్రనాశకాలు తోటలలో పిచికారీ చేయబడతాయి.శిలీంద్ర సంహారిణులు పరాగసంపర్కానికి హానిచేయనివిగా పరిగణించబడతాయి, కాబట్టి అవి పుష్పించే కాలంలో తోటమాలికి సిఫార్సు చేయబడతాయి;ఈ శిలీంద్రనాశకాలను తేనెటీగలు బహిర్గతం చేయడం మరియు తీసుకోవడం సాపేక్షంగా బాగా తెలుసు, ఎందుకంటే ఇది US పర్యావరణ పరిరక్షణ సంస్థ మరియు అనేక ఇతర జాతీయ నియంత్రణ సంస్థలచే పురుగుమందుల నమోదు ప్రక్రియలో భాగం12,13,14.అయినప్పటికీ, తేనెటీగలు కాని వాటిపై శిలీంద్ర సంహారిణుల ప్రభావాలు తక్కువగా తెలుసు, ఎందుకంటే యునైటెడ్ స్టేట్స్‌లో మార్కెటింగ్ అధికార ఒప్పందాల ప్రకారం అవి అవసరం లేదు.అదనంగా, ఒకే తేనెటీగలను పరీక్షించడానికి సాధారణంగా ప్రామాణికమైన ప్రోటోకాల్‌లు లేవు16,17, మరియు పరీక్ష కోసం తేనెటీగలను అందించే కాలనీలను నిర్వహించడం సవాలుగా ఉంది18.అడవి తేనెటీగలపై పురుగుమందుల ప్రభావాలను అధ్యయనం చేయడానికి యూరప్ మరియు USAలో వివిధ నిర్వహించబడే తేనెటీగల ట్రయల్స్ ఎక్కువగా నిర్వహించబడుతున్నాయి మరియు O. కార్నిఫ్రాన్స్19 కోసం ప్రామాణికమైన ప్రోటోకాల్‌లు ఇటీవల అభివృద్ధి చేయబడ్డాయి.
కొమ్ముల తేనెటీగలు మోనోసైట్లు మరియు వాణిజ్యపరంగా కార్ప్ పంటలలో తేనెటీగలకు అనుబంధంగా లేదా ప్రత్యామ్నాయంగా ఉపయోగించబడతాయి.ఈ తేనెటీగలు మార్చి మరియు ఏప్రిల్ మధ్యకాలంలో ఉద్భవించాయి, ఆడపిల్లల కంటే మూడు నుండి నాలుగు రోజుల ముందు మగపిల్లలు పుట్టుకొస్తాయి.సంభోగం తర్వాత, ఆడ గొట్టపు గూడు కుహరం (సహజ లేదా కృత్రిమ) 1,20 లోపల సంతానోత్పత్తి కణాల శ్రేణిని అందించడానికి పుప్పొడి మరియు తేనెను చురుకుగా సేకరిస్తుంది.కణాల లోపల పుప్పొడిపై గుడ్లు పెడతారు;ఆడ తరువాతి కణాన్ని సిద్ధం చేయడానికి ముందు ఒక మట్టి గోడను నిర్మిస్తుంది.మొదటి ఇన్‌స్టార్ లార్వా కోరియోన్‌లో మూసుకుపోయి పిండ ద్రవాలను తింటాయి.రెండవ నుండి ఐదవ ఇన్‌స్టార్ (ప్రెపుపా) వరకు, లార్వా పుప్పొడిని తింటాయి22.పుప్పొడి సరఫరా పూర్తిగా క్షీణించిన తర్వాత, లార్వా కోకోన్‌లను ఏర్పరుస్తుంది, ప్యూపేట్ మరియు అదే బ్రూడ్ చాంబర్‌లో పెద్దలుగా బయటపడతాయి, సాధారణంగా వేసవి చివరిలో20,23.పెద్దలు తరువాతి వసంతకాలంలో బయటపడతారు.పెద్దల మనుగడ ఆహారం తీసుకోవడం ఆధారంగా నికర శక్తి పెరుగుదల (బరువు పెరుగుట) తో ముడిపడి ఉంటుంది.అందువల్ల, పుప్పొడి యొక్క పోషక నాణ్యత, అలాగే వాతావరణం లేదా పురుగుమందులకు గురికావడం వంటి ఇతర అంశాలు మనుగడ మరియు ఆరోగ్యాన్ని నిర్ణయిస్తాయి24.
పుష్పించే ముందు వర్తించే క్రిమిసంహారకాలు మరియు శిలీంద్రనాశకాలు మొక్కల వాస్కులేచర్‌లో ట్రాన్స్‌లామినార్ నుండి వివిధ స్థాయిలకు కదులుతాయి (ఉదా, కొన్ని శిలీంద్రనాశకాల వలె ఆకుల ఎగువ ఉపరితలం నుండి దిగువ ఉపరితలం వరకు కదలగలవు) [25] నుండి నిజంగా దైహిక ప్రభావాలు., ఇది మూలాల నుండి కిరీటంలోకి చొచ్చుకుపోగలదు, ఆపిల్ పువ్వుల తేనెలోకి ప్రవేశించవచ్చు26, అక్కడ వారు వయోజన O. కార్నిఫ్రాన్స్27ని చంపవచ్చు.కొన్ని పురుగుమందులు పుప్పొడిలోకి కూడా చేరి, మొక్కజొన్న లార్వాల అభివృద్ధిని ప్రభావితం చేస్తాయి మరియు వాటి మరణానికి కారణమవుతాయి.ఇతర అధ్యయనాలు కొన్ని శిలీంద్రనాశకాలు సంబంధిత జాతుల O. lignaria28 యొక్క గూడు ప్రవర్తనను గణనీయంగా మార్చగలవని చూపించాయి.అదనంగా, పురుగుమందులు బహిర్గతమయ్యే దృశ్యాలను (శిలీంద్రనాశకాలతో సహా) అనుకరించే ప్రయోగశాల మరియు క్షేత్ర అధ్యయనాలు పురుగుమందులు శరీరధర్మ శాస్త్రం 22 పదనిర్మాణం [29] మరియు తేనెటీగలు మరియు కొన్ని ఒంటరి తేనెటీగల మనుగడను ప్రతికూలంగా ప్రభావితం చేస్తాయని చూపించాయి.పుష్పించే సమయంలో పువ్వులు తెరవడానికి నేరుగా వర్తించే వివిధ శిలీంద్ర సంహారిణి స్ప్రేలు లార్వా అభివృద్ధి కోసం పెద్దలు సేకరించిన పుప్పొడిని కలుషితం చేస్తాయి, దీని ప్రభావాలను అధ్యయనం చేయవలసి ఉంది30.
జీర్ణవ్యవస్థలోని పుప్పొడి మరియు సూక్ష్మజీవుల సంఘాల ద్వారా లార్వా అభివృద్ధి ప్రభావితమవుతుందని ఎక్కువగా గుర్తించబడింది.తేనెటీగ మైక్రోబయోమ్ శరీర ద్రవ్యరాశి 31, జీవక్రియ మార్పులు22 మరియు వ్యాధికారక కారకాలకు గ్రహణశీలత వంటి పారామితులను ప్రభావితం చేస్తుంది.మునుపటి అధ్యయనాలు ఒంటరి తేనెటీగల సూక్ష్మజీవిపై అభివృద్ధి దశ, పోషకాలు మరియు పర్యావరణం యొక్క ప్రభావాన్ని పరిశీలించాయి.ఈ అధ్యయనాలు లార్వా మరియు పుప్పొడి సూక్ష్మజీవుల నిర్మాణం మరియు సమృద్ధిలో సారూప్యతను వెల్లడించాయి, అలాగే ఒంటరి తేనెటీగ జాతులలో అత్యంత సాధారణ బ్యాక్టీరియా జాతులు సూడోమోనాస్ మరియు డెల్ఫ్టియా.అయినప్పటికీ, తేనెటీగ ఆరోగ్యాన్ని రక్షించే వ్యూహాలతో శిలీంద్ర సంహారిణులు సంబంధం కలిగి ఉన్నప్పటికీ, నేరుగా నోటి ద్వారా బహిర్గతం చేయడం ద్వారా లార్వా మైక్రోబయోటాపై శిలీంద్రనాశకాల ప్రభావాలు కనిపెట్టబడలేదు.
ఈ అధ్యయనం యునైటెడ్ స్టేట్స్‌లో చెట్ల పండ్లపై ఉపయోగం కోసం నమోదు చేయబడిన ఆరు సాధారణంగా ఉపయోగించే శిలీంద్రనాశకాల యొక్క వాస్తవ-ప్రపంచ మోతాదుల ప్రభావాలను పరీక్షించింది, ఇందులో కలుషితమైన ఆహారం నుండి మొక్కజొన్న హార్న్‌వార్మ్ చిమ్మట లార్వాకు మౌఖికంగా ఇవ్వబడిన పరిచయం మరియు దైహిక శిలీంద్రనాశకాలు ఉన్నాయి.మాంకోజెబ్ మరియు పైరిథియోపైడ్‌లతో అత్యంత తీవ్రమైన ప్రభావాలతో, పరిచయం మరియు దైహిక శిలీంద్రనాశకాలు తేనెటీగ శరీర బరువు పెరుగుట మరియు మరణాలను పెంచాయని మేము కనుగొన్నాము.మేము మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన పుప్పొడి ఆహారంలో తినిపించిన లార్వా యొక్క సూక్ష్మజీవుల వైవిధ్యాన్ని నియంత్రణ ఆహారంతో తినిపించే వాటితో పోల్చాము.సమీకృత తెగులు మరియు పరాగ సంపర్క నిర్వహణ (IPPM)36 ప్రోగ్రామ్‌ల కోసం మరణాలు మరియు చిక్కులను అంతర్లీనంగా కలిగి ఉన్న సంభావ్య యంత్రాంగాలను మేము చర్చిస్తాము.
కోకోన్‌లలో ఓవర్‌వింటరింగ్ చేసే అడల్ట్ O. కార్నిఫ్రాన్‌లు ఫ్రూట్ రీసెర్చ్ సెంటర్, బిగ్లెర్‌విల్లే, PA నుండి పొందబడ్డాయి మరియు −3 నుండి 2°C (±0.3°C) వద్ద నిల్వ చేయబడ్డాయి.ప్రయోగానికి ముందు (మొత్తం 600 కోకోన్లు).మే 2022లో, 100 O. కార్నిఫ్రాన్స్ కోకోన్‌లు ప్రతిరోజూ ప్లాస్టిక్ కప్పుల్లోకి బదిలీ చేయబడ్డాయి (ఒక కప్పుకు 50 కోకోన్‌లు, DI 5 సెం.మీ. × 15 సెం.మీ పొడవు) మరియు కప్పులు తెరవడాన్ని ప్రోత్సహించడానికి మరియు నమలగలిగే సబ్‌స్ట్రేట్‌ను అందించడానికి, స్టోనీపై ఒత్తిడిని తగ్గించడానికి కప్పుల లోపల వైప్‌లు ఉంచబడ్డాయి. తేనెటీగలు37.50% సుక్రోజ్ ద్రావణాన్ని కలిగి ఉన్న 10 ml ఫీడర్‌లతో (30 × 30 × 30 cm, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) కోకోన్‌లను కలిగి ఉన్న రెండు ప్లాస్టిక్ కప్పులను మూసివేసి, సంభోగాన్ని నిర్ధారించడానికి నాలుగు రోజుల పాటు నిల్వ చేయండి.23°C, సాపేక్ష ఆర్ద్రత 60%, ఫోటోపెరియోడ్ 10 l (తక్కువ తీవ్రత): 14 రోజులు.గరిష్టంగా ఆపిల్ పుష్పించే సమయంలో (ట్రాప్ గూడు: వెడల్పు 33.66 × ఎత్తు 30.48 × పొడవు 46.99 సెం.మీ.; అనుబంధ మూర్తి 1) ఆరు రోజుల పాటు (రోజుకు 100) జంటగా ఉన్న 100 ఆడ మరియు మగలను ప్రతిరోజూ ఉదయం రెండు కృత్రిమ గూళ్ళలోకి విడుదల చేస్తారు.పెన్సిల్వేనియా స్టేట్ ఆర్బోరేటమ్‌లో, చెర్రీకి సమీపంలో (ప్రూనస్ సెరాసస్ 'యూబ్యాంక్' స్వీట్ చెర్రీ పై™), పీచ్ (ప్రూనస్ పెర్సికా 'కాంటెండర్'), ప్రూనస్ పెర్సికా 'PF 27A' ఫ్లామిన్ ఫ్యూరీ®), పియర్ (పైరస్ పెరిసిఫోలియా, ఒయిరుమ్ పెరిఫోలియా ' పెరిఫోలియా 'షింకో', పైరస్ పెరిఫోలియా 'షిన్సేకి'), కరోనేరియా యాపిల్ ట్రీ (మలస్ కరోనారియా) మరియు అనేక రకాల ఆపిల్ చెట్లు (మలస్ కరోనరియా, మలస్), దేశీయ ఆపిల్ చెట్టు 'కో-ఆప్ 30′ ఎంటర్‌ప్రైజ్™, మలస్ యాపిల్ ట్రీ 'కో- ఆప్ 31′ వైన్‌క్రిస్ప్™, బిగోనియా 'ఫ్రీడమ్', బెగోనియా 'గోల్డెన్ డెలిషియస్', బెగోనియా 'నోవా స్పై').ప్రతి నీలం ప్లాస్టిక్ బర్డ్‌హౌస్ రెండు చెక్క పెట్టెల పైన సరిపోతుంది.ప్రతి గూడు పెట్టెలో 800 ఖాళీ క్రాఫ్ట్ పేపర్ ట్యూబ్‌లు (స్పైరల్ ఓపెన్, 0.8 cm ID × 15 cm L) (జోన్స్‌విల్లే పేపర్ ట్యూబ్ కో., మిచిగాన్) అపారదర్శక సెల్లోఫేన్ ట్యూబ్‌లలోకి చొప్పించబడ్డాయి (0.7 OD చూడండి ప్లాస్టిక్ ప్లగ్‌లు (T-1X ప్లగ్‌లు) నేస్టింగ్ అందించేవి. .
రెండు గూడు పెట్టెలు తూర్పు ముఖంగా ఉన్నాయి మరియు ఎలుకలు మరియు పక్షుల ప్రవేశాన్ని నిరోధించడానికి ఆకుపచ్చ ప్లాస్టిక్ గార్డెన్ ఫెన్సింగ్ (ఎవర్‌బిల్ట్ మోడల్ #889250EB12, ఓపెనింగ్ సైజు 5 × 5 సెం.మీ., 0.95 మీ పెట్టెలు.నెస్ట్ బాక్స్ (సప్లిమెంటరీ ఫిగర్ 1a).మొక్కజొన్న తొలుచు పురుగు గుడ్లను గూళ్ల నుంచి 30 గొట్టాలను సేకరించి వాటిని ప్రయోగశాలకు తరలించి రోజూ సేకరించారు.కత్తెరను ఉపయోగించి, ట్యూబ్ చివర కట్ చేయండి, ఆపై బ్రూడ్ కణాలను బహిర్గతం చేయడానికి స్పైరల్ ట్యూబ్‌ను విడదీయండి.వక్ర గరిటెలాంటి (మైక్రోస్లైడ్ టూల్ కిట్, బయోక్విప్ ప్రొడక్ట్స్ ఇంక్., కాలిఫోర్నియా) ఉపయోగించి వ్యక్తిగత గుడ్లు మరియు వాటి పుప్పొడిని తొలగించారు.గుడ్లు తడి వడపోత కాగితంపై పొదిగేవి మరియు మా ప్రయోగాలలో ఉపయోగించే ముందు 2 గంటల పాటు పెట్రీ డిష్‌లో ఉంచబడ్డాయి (అనుబంధ మూర్తి 1b-d).
ప్రయోగశాలలో, మేము మూడు సాంద్రతలలో (0.1X, 0.5X, మరియు 1X, ఇక్కడ 1X అనేది 100 గ్యాలన్ల నీరు/ఎకరానికి వర్తించే మార్కు. అధిక క్షేత్ర మోతాదు = ఏకాగ్రత) మూడు సాంద్రతలలో (0.1X, 0.5X మరియు 1X) ఆరు శిలీంద్రనాశకాల యొక్క నోటి విషపూరితతను మేము అంచనా వేసాము. రంగంలో)., టేబుల్ 1).ప్రతి ఏకాగ్రత 16 సార్లు పునరావృతమవుతుంది (n = 16).రెండు సంపర్క శిలీంద్రనాశకాలు (టేబుల్ S1: మాంకోజెబ్ 2696.14 ppm మరియు కాప్టాన్ 2875.88 ppm) మరియు నాలుగు దైహిక శిలీంద్రనాశకాలు (టేబుల్ S1: పైరిథియోస్ట్రోబిన్ 250.14 ppm; trifloxystrobin 110.06 ppm; 81 myclobutanil; ppm) పండ్లు, కూరగాయలు మరియు అలంకార పంటలకు విషపూరితం .మేము గ్రైండర్‌ను ఉపయోగించి పుప్పొడిని సజాతీయంగా మార్చాము, 0.20 గ్రా బావికి (24-బావి ఫాల్కన్ ప్లేట్) బదిలీ చేసాము మరియు 1 μL శిలీంద్ర సంహారిణి ద్రావణాన్ని జోడించి, మిళితం చేసి పిరమిడ్ పుప్పొడిని 1 మిమీ లోతైన బావులతో ఏర్పరచాము, అందులో గుడ్లు ఉంచాము.చిన్న గరిటెలాంటి (సప్లిమెంటరీ ఫిగర్ 1 సి, డి) ఉపయోగించి ఉంచండి.ఫాల్కన్ ప్లేట్లు గది ఉష్ణోగ్రత (25 ° C) మరియు 70% సాపేక్ష ఆర్ద్రత వద్ద నిల్వ చేయబడ్డాయి.మేము వాటిని నియంత్రణ లార్వాతో పోల్చాము, స్వచ్ఛమైన నీటితో చికిత్స చేయబడిన సజాతీయ పుప్పొడి ఆహారాన్ని అందించాము.విశ్లేషణాత్మక బ్యాలెన్స్ (ఫిషర్ సైంటిఫిక్, ఖచ్చితత్వం = 0.0001 గ్రా) ఉపయోగించి లార్వా ప్రిప్యూపల్ వయస్సు వచ్చే వరకు మేము ప్రతిరోజూ మరణాలను నమోదు చేస్తాము మరియు లార్వా బరువును కొలుస్తాము.చివరగా, 2.5 నెలల తర్వాత కోకన్ తెరవడం ద్వారా లింగ నిష్పత్తి అంచనా వేయబడింది.
DNA మొత్తం O. కార్నిఫ్రాన్స్ లార్వా నుండి సంగ్రహించబడింది (చికిత్స స్థితికి n = 3, మాంకోజెబ్-చికిత్స మరియు చికిత్స చేయని పుప్పొడి) మరియు మేము ఈ నమూనాలపై సూక్ష్మజీవుల వైవిధ్య విశ్లేషణలను చేసాము, ప్రత్యేకించి మాంకోజెబ్‌లో లార్వాలలో అత్యధిక మరణాలు గమనించబడ్డాయి.MnZn స్వీకరించడం.DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA కిట్ (Zymo Research, Irvine, CA)ని ఉపయోగించి DNA విస్తరించబడింది, శుద్ధి చేయబడింది మరియు v3 కిట్‌ని ఉపయోగించి Illumina® MiSeq™లో (600 సైకిల్స్) సీక్వెన్స్ చేయబడింది.16S rRNA జన్యువు యొక్క V3-V4 ప్రాంతాన్ని లక్ష్యంగా చేసుకుని ప్రైమర్‌లను ఉపయోగించి క్విక్-16S™ NGS లైబ్రరీ ప్రిపరేషన్ కిట్ (జిమో రీసెర్చ్, ఇర్విన్, CA) ఉపయోగించి బ్యాక్టీరియా 16S రైబోసోమల్ RNA జన్యువుల లక్ష్య క్రమాన్ని ప్రదర్శించారు.అదనంగా, 18S సీక్వెన్సింగ్ 10% PhiX చేరికను ఉపయోగించి ప్రదర్శించబడింది మరియు ప్రైమర్ జత 18S001 మరియు NS4 ఉపయోగించి యాంప్లిఫికేషన్ నిర్వహించబడింది.
QIIME2 పైప్‌లైన్ (v2022.11.1) ఉపయోగించి జత చేసిన రీడ్‌లను దిగుమతి చేయండి మరియు ప్రాసెస్ చేయండి.ఈ రీడ్‌లు కత్తిరించబడ్డాయి మరియు విలీనం చేయబడ్డాయి మరియు QIIME2 (qiime dada2 నాయిస్ పెయిరింగ్)40లో DADA2 ప్లగిన్‌ని ఉపయోగించి చిమెరిక్ సీక్వెన్సులు తీసివేయబడ్డాయి.16S మరియు 18S క్లాస్ అసైన్‌మెంట్‌లు ఆబ్జెక్ట్ క్లాసిఫైయర్ ప్లగ్ఇన్ Classify-sklearn మరియు ప్రీ-ట్రైన్డ్ ఆర్టిఫ్యాక్ట్ silva-138-99-nb-classifier ఉపయోగించి నిర్వహించబడ్డాయి.
అన్ని ప్రయోగాత్మక డేటా సాధారణత (షాపిరో-విల్క్స్) మరియు వ్యత్యాసాల సజాతీయత (లెవెన్ యొక్క పరీక్ష) కోసం తనిఖీ చేయబడింది.డేటా సెట్ పారామెట్రిక్ విశ్లేషణ యొక్క ఊహలను అందుకోలేదు మరియు అవశేషాలను ప్రామాణీకరించడంలో పరివర్తన విఫలమైంది, మేము రెండు కారకాలతో [సమయం (మూడు-దశ 2, 5 మరియు 8 రోజులు) నాన్‌పారామెట్రిక్ టూ-వే ANOVA (క్రుస్కల్-వాలిస్)ని ప్రదర్శించాము. సమయం పాయింట్లు) మరియు శిలీంద్ర సంహారిణి] లార్వా తాజా బరువుపై చికిత్స యొక్క ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి, విల్కాక్సన్ పరీక్షను ఉపయోగించి పోస్ట్ హాక్ నాన్‌పారామెట్రిక్ జత వైపు పోలికలు జరిగాయి.మూడు శిలీంద్ర సంహారిణి సాంద్రతలలో 41, 42 మనుగడపై శిలీంద్రనాశకాల ప్రభావాలను పోల్చడానికి మేము పాయిజన్ పంపిణీతో సాధారణీకరించిన సరళ నమూనా (GLM)ని ఉపయోగించాము.అవకలన సమృద్ధి విశ్లేషణ కోసం, యాంప్లికాన్ సీక్వెన్స్ వేరియంట్‌ల (ASVలు) సంఖ్య జాతి స్థాయిలో కుదించబడింది.16S (జాతి స్థాయి) మరియు 18S సాపేక్ష సమృద్ధిని ఉపయోగించే సమూహాల మధ్య భేదాత్మక సమృద్ధి యొక్క పోలికలు బీటా జీరో-ఇన్‌ఫ్లేటెడ్ (BEZI) కుటుంబ పంపిణీలతో స్థానం, స్కేల్ మరియు ఆకారం (GAMLSS) కోసం సాధారణీకరించిన సంకలిత నమూనాను ఉపయోగించి నిర్వహించబడ్డాయి, ఇవి స్థూల ఆధారంగా రూపొందించబడ్డాయి. .మైక్రోబయోమ్ R43లో (v1.1).1)అవకలన విశ్లేషణకు ముందు మైటోకాన్డ్రియల్ మరియు క్లోరోప్లాస్ట్ జాతులను తొలగించండి.18S యొక్క విభిన్న వర్గీకరణ స్థాయిల కారణంగా, ప్రతి టాక్సన్ యొక్క అత్యల్ప స్థాయి మాత్రమే అవకలన విశ్లేషణలకు ఉపయోగించబడింది.అన్ని గణాంక విశ్లేషణలు R (v. 3.4.3., CRAN ప్రాజెక్ట్) (టీమ్ 2013) ఉపయోగించి నిర్వహించబడ్డాయి.
మాంకోజెబ్, పైరిథియోస్ట్రోబిన్ మరియు ట్రైఫ్లోక్సీస్ట్రోబిన్‌లకు గురికావడం వల్ల O. కార్నిఫ్రాన్స్‌లో శరీర బరువు పెరుగుట గణనీయంగా తగ్గింది (Fig. 1).అంచనా వేసిన మూడు మోతాదుల కోసం ఈ ప్రభావాలు స్థిరంగా గమనించబడ్డాయి (Fig. 1a-c).సైక్లోస్ట్రోబిన్ మరియు మైక్లోబుటానిల్ లార్వా బరువును గణనీయంగా తగ్గించలేదు.
కాండం తొలిచే పురుగు లార్వా యొక్క సగటు తాజా బరువును నాలుగు ఆహార చికిత్సల క్రింద మూడు సమయాలలో కొలుస్తారు (సజాతీయ పుప్పొడి ఫీడ్ + శిలీంద్ర సంహారిణి: నియంత్రణ, 0.1X, 0.5X మరియు 1X ​​మోతాదులు).(a) తక్కువ మోతాదు (0.1X): మొదటిసారి పాయింట్ (రోజు 1): χ2: 30.99, DF = 6;P <0.0001, రెండవసారి పాయింట్ (రోజు 5): 22.83, DF = 0.0009;మూడవసారి;పాయింట్ (8వ రోజు): χ2: 28.39, DF = 6;(బి) సగం మోతాదు (0.5X): మొదటిసారి పాయింట్ (రోజు 1): χ2: 35.67, DF = 6;P <0.0001, రెండవసారి పాయింట్ (రోజు మొదటిది).): χ2: 15.98, DF = 6;P = 0.0090;మూడవసారి పాయింట్ (8వ రోజు) χ2: 16.47, DF = 6;(సి) సైట్ లేదా పూర్తి మోతాదు (1X): మొదటిసారి పాయింట్ (రోజు 1) χ2: 20.64, P = 6;P = 0.0326, రెండవసారి పాయింట్ (రోజు 5): χ2: 22.83, DF = 6;P = 0.0009;మూడవసారి పాయింట్ (8వ రోజు): χ2: 28.39, DF = 6;వ్యత్యాసం యొక్క నాన్‌పారామెట్రిక్ విశ్లేషణ.బార్‌లు పెయిర్‌వైస్ పోలికల సగటు ± SEని సూచిస్తాయి (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
అత్యల్ప మోతాదులో (0.1X), లార్వా శరీర బరువు ట్రైఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్‌తో 60%, మాంకోజెబ్‌తో 49%, మైక్లోబుటానిల్‌తో 48% మరియు పైరిథిస్ట్రోబిన్‌తో 46% తగ్గింది (Fig. 1a).సగం ఫీల్డ్ డోస్ (0.5X)కి గురైనప్పుడు, మాంకోజెబ్ లార్వాల శరీర బరువు 86%, పైరిథియోస్ట్రోబిన్ 52% మరియు ట్రైఫ్లోక్సీస్ట్రోబిన్ 50% తగ్గింది (Fig. 1b).మాంకోజెబ్ యొక్క పూర్తి ఫీల్డ్ డోస్ (1X) లార్వా బరువును 82%, పైరిథియోస్ట్రోబిన్ 70% మరియు ట్రిఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్, మైక్లోబుటానిల్ మరియు సంగర్డ్‌లను సుమారు 30% తగ్గించింది (Fig. 1c).
మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన పుప్పొడి తినిపించిన లార్వాలో మరణాలు అత్యధికంగా ఉన్నాయి, తరువాత పైరిథియోస్ట్రోబిన్ మరియు ట్రైఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్ ఉన్నాయి.మాంకోజెబ్ మరియు పైరిటిసోలిన్ మోతాదుల పెరుగుదలతో మరణాలు పెరిగాయి (Fig. 2; టేబుల్ 2).అయినప్పటికీ, ట్రైఫ్లోక్సీస్ట్రోబిన్ సాంద్రతలు పెరిగినందున మొక్కజొన్న తొలుచు పురుగుల మరణాలు కొద్దిగా మాత్రమే పెరిగాయి;నియంత్రణ చికిత్సలతో పోలిస్తే సైప్రోడినిల్ మరియు క్యాప్టాన్ మరణాలను గణనీయంగా పెంచలేదు.
ఆరు వేర్వేరు శిలీంద్రనాశకాలతో వ్యక్తిగతంగా చికిత్స చేసిన పుప్పొడిని తీసుకున్న తర్వాత బోరర్ ఫ్లై లార్వాల మరణాలను పోల్చారు.మాంకోజెబ్ మరియు పెంటోపిరమైడ్ మొక్కజొన్న మాగ్గోట్‌లకు నోటి ద్వారా బహిర్గతం కావడానికి ఎక్కువ సున్నితంగా ఉంటాయి (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (రేఖ, వాలు = 0.29, P <0.001; వాలు = <0.20,) P).
సగటున, అన్ని చికిత్సలలో, 39.05% మంది రోగులు స్త్రీలు మరియు 60.95% మంది పురుషులు.నియంత్రణ చికిత్సలలో, తక్కువ-మోతాదు (0.1X) మరియు సగం-మోతాదు (0.5X) అధ్యయనాలలో మహిళల నిష్పత్తి 40% మరియు ఫీల్డ్-డోస్ (1X) అధ్యయనాలలో 30%.0.1X మోతాదులో, మాంకోజెబ్ మరియు మైక్లోబుటానిల్‌తో చికిత్స చేయబడిన పుప్పొడి-తినిపించిన లార్వాలో, 33.33% పెద్దలు ఆడవారు, 22% పెద్దలు ఆడవారు, 44% వయోజన లార్వా ఆడవారు, 44% వయోజన లార్వాలు ఆడవి.ఆడ, వయోజన లార్వాలలో 41% స్త్రీలు, మరియు నియంత్రణలు 31% (Fig. 3a).0.5 రెట్లు మోతాదులో, మాంకోజెబ్ మరియు పైరిథియోస్ట్రోబిన్ సమూహంలో 33% వయోజన పురుగులు ఆడవి, 36% ట్రైఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్ సమూహంలో, 41% మైక్లోబుటానిల్ సమూహంలో మరియు 46% సైప్రోస్ట్రోబిన్ సమూహంలో ఉన్నాయి.సమూహంలో ఈ సంఖ్య 53%.కాప్టాన్ సమూహంలో మరియు నియంత్రణ సమూహంలో 38% (Fig. 3b).1X మోతాదులో, మాంకోజెబ్ సమూహంలో 30% మహిళలు, పైరిథియోస్ట్రోబిన్ సమూహంలో 36%, ట్రైఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్ సమూహంలో 44%, మైక్లోబుటానిల్ సమూహంలో 38%, నియంత్రణ సమూహంలో 50% మహిళలు - 38.5% (Fig. 3c) .
లార్వా దశ శిలీంద్ర సంహారిణిని బహిర్గతం చేసిన తర్వాత ఆడ మరియు మగ పురుగుల శాతం.(a) తక్కువ మోతాదు (0.1X).(బి) సగం మోతాదు (0.5X).(సి) ఫీల్డ్ డోస్ లేదా పూర్తి మోతాదు (1X).
16S సీక్వెన్స్ విశ్లేషణలో బాక్టీరియా సమూహం మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన పుప్పొడితో తినిపించిన లార్వా మరియు చికిత్స చేయని పుప్పొడి (Fig. 4a)తో తినిపించిన లార్వాల మధ్య తేడా ఉందని చూపించింది.మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన పుప్పొడి (Fig. 4b)పై తినే లార్వా కంటే పుప్పొడిపై తినిపించని చికిత్స చేయని లార్వాల సూక్ష్మజీవుల సూచిక ఎక్కువగా ఉంది.సమూహాల మధ్య రిచ్‌నెస్‌లో గమనించిన వ్యత్యాసం గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనది కానప్పటికీ, చికిత్స చేయని పుప్పొడి (Fig. 4c)పై లార్వాల ఆహారం కోసం గమనించిన దానికంటే ఇది చాలా తక్కువగా ఉంది.మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన లార్వా (Fig. 5a) మీద ఫీడ్ చేసిన లార్వా కంటే నియంత్రణ పుప్పొడిపై లార్వా యొక్క మైక్రోబయోటా చాలా వైవిధ్యంగా ఉందని సాపేక్ష సమృద్ధి చూపించింది.వివరణాత్మక విశ్లేషణ నియంత్రణలో 28 జాతుల ఉనికిని మరియు మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన నమూనాలను వెల్లడించింది (Fig. 5b).c 18S సీక్వెన్సింగ్‌ని ఉపయోగించి విశ్లేషణ గణనీయమైన తేడాలను వెల్లడించలేదు (సప్లిమెంటరీ ఫిగర్ 2).
16S సీక్వెన్స్‌ల ఆధారంగా SAV ప్రొఫైల్‌లు షానన్ రిచ్‌నెస్‌తో పోల్చబడ్డాయి మరియు ఫైలమ్ స్థాయిలో రిచ్‌నెస్‌ను గమనించాయి.(ఎ) చికిత్స చేయని పుప్పొడి లేదా నియంత్రణ (నీలం) మరియు మాంకోజెబ్-తినిపించిన లార్వా (నారింజ)లో మొత్తం సూక్ష్మజీవుల సంఘం నిర్మాణం ఆధారంగా ప్రిన్సిపల్ కోఆర్డినేట్ విశ్లేషణ (PCoA).ప్రతి డేటా పాయింట్ ప్రత్యేక నమూనాను సూచిస్తుంది.మల్టీవియారిట్ టి పంపిణీ యొక్క బ్రే-కర్టిస్ దూరాన్ని ఉపయోగించి PCoA లెక్కించబడుతుంది.Ovalలు 80% విశ్వాస స్థాయిని సూచిస్తాయి.(బి) బాక్స్‌ప్లాట్, ముడి షానన్ సంపద డేటా (పాయింట్లు) మరియు సి.గమనించదగిన సంపద.బాక్స్‌ప్లాట్‌లు మధ్యస్థ రేఖ, ఇంటర్‌క్వార్టైల్ పరిధి (IQR) మరియు 1.5 × IQR (n = 3) కోసం పెట్టెలను చూపుతాయి.
మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన మరియు చికిత్స చేయని పుప్పొడిపై తినిపించే లార్వా యొక్క సూక్ష్మజీవుల సంఘాల కూర్పు.(ఎ) లార్వాలో సూక్ష్మజీవుల జాతుల సాపేక్ష సమృద్ధి చదవబడుతుంది.(బి) గుర్తించబడిన సూక్ష్మజీవుల సంఘాల హీట్ మ్యాప్.డెల్ఫ్టియా (అసమానత నిష్పత్తి (OR) = 0.67, P = 0.0030) మరియు సూడోమోనాస్ (OR = 0.3, P = 0.0074), మైక్రోబాక్టీరియం (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.006);సహసంబంధ దూరం మరియు సగటు కనెక్టివిటీని ఉపయోగించి హీట్ మ్యాప్ అడ్డు వరుసలు క్లస్టర్ చేయబడ్డాయి.
పుష్పించే సమయంలో విస్తృతంగా వర్తించే కాంటాక్ట్ (మాంకోజెబ్) మరియు దైహిక (పైరోస్ట్రోబిన్ మరియు ట్రైఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్) శిలీంద్రనాశకాలను నోటి ద్వారా బహిర్గతం చేయడం వల్ల బరువు పెరగడం మరియు మొక్కజొన్న లార్వాల మరణాలు గణనీయంగా తగ్గాయని మా ఫలితాలు చూపిస్తున్నాయి.అదనంగా, మాంకోజెబ్ ప్రీపుపల్ దశలో సూక్ష్మజీవి యొక్క వైవిధ్యం మరియు గొప్పతనాన్ని గణనీయంగా తగ్గించింది.మైక్లోబుటానిల్, మరొక దైహిక శిలీంద్ర సంహారిణి, మూడు మోతాదులలో లార్వా శరీర బరువును గణనీయంగా తగ్గించింది.ఈ ప్రభావం రెండవ (రోజు 5) మరియు మూడవ (రోజు 8) సమయ పాయింట్లలో స్పష్టంగా కనిపించింది.దీనికి విరుద్ధంగా, నియంత్రణ సమూహంతో పోలిస్తే సైప్రోడినిల్ మరియు క్యాప్టాన్ బరువు పెరుగుట లేదా మనుగడను గణనీయంగా తగ్గించలేదు.మా జ్ఞానం ప్రకారం, ప్రత్యక్ష పుప్పొడి బహిర్గతం ద్వారా మొక్కజొన్న పంటలను రక్షించడానికి ఉపయోగించే వివిధ శిలీంద్రనాశకాల యొక్క క్షేత్ర రేట్ల ప్రభావాలను నిర్ణయించడంలో ఈ పని మొదటిది.
నియంత్రణ చికిత్సలతో పోలిస్తే అన్ని శిలీంద్ర సంహారిణి చికిత్సలు శరీర బరువును గణనీయంగా తగ్గించాయి.మాంకోజెబ్ లార్వా శరీర బరువు పెరుగుదలపై అత్యధిక ప్రభావాన్ని చూపింది, సగటున 51% తగ్గుదల, తరువాత పైరిథియోస్ట్రోబిన్.అయినప్పటికీ, ఇతర అధ్యయనాలు లార్వా దశలపై శిలీంద్రనాశకాల క్షేత్ర మోతాదుల యొక్క ప్రతికూల ప్రభావాలను నివేదించలేదు.డైథియోకార్బమేట్ బయోసైడ్‌లు తక్కువ తీవ్రమైన విషపూరితం కలిగి ఉన్నట్లు చూపబడినప్పటికీ, మాంకోజెబ్ వంటి ఇథిలీన్ బిస్డిథియోకార్బమేట్స్ (EBDCS) యూరియా ఇథిలీన్ సల్ఫైడ్‌గా మారవచ్చు.ఇతర జంతువులలో దాని ఉత్పరివర్తన ప్రభావాలను బట్టి, ఈ క్షీణత ఉత్పత్తి గమనించిన ప్రభావాలకు కారణం కావచ్చు46,47.ఎలివేటెడ్ ఉష్ణోగ్రత48, తేమ స్థాయిలు49 మరియు ఉత్పత్తి నిల్వ పొడవు వంటి కారకాల ద్వారా ఇథిలీన్ థియోరియా ఏర్పడటం ప్రభావితమవుతుందని మునుపటి అధ్యయనాలు చూపించాయి.బయోసైడ్‌ల కోసం సరైన నిల్వ పరిస్థితులు ఈ దుష్ప్రభావాలను తగ్గించగలవు.అదనంగా, యూరోపియన్ ఫుడ్ సేఫ్టీ అథారిటీ పైరిథియోపైడ్ యొక్క విషపూరితం గురించి ఆందోళన వ్యక్తం చేసింది, ఇది ఇతర జంతువుల జీర్ణ వ్యవస్థలకు క్యాన్సర్ కారకమని తేలింది51.
మాంకోజెబ్, పైరిథియోస్ట్రోబిన్ మరియు ట్రిఫ్లోక్సీస్ట్రోబిన్ నోటి ద్వారా తీసుకోవడం వల్ల మొక్కజొన్న పురుగు లార్వాల మరణాలు పెరుగుతాయి.దీనికి విరుద్ధంగా, మైక్లోబుటానిల్, సిప్రోసైక్లిన్ మరియు క్యాప్టాన్ మరణాలపై ప్రభావం చూపలేదు.ఈ ఫలితాలు లాడర్నర్ et al.52 నుండి భిన్నంగా ఉంటాయి, వీరు పెద్దల O. లిగ్నేరియా మరియు అపిస్ మెల్లిఫెరా L. (Hymenoptera, Apisidae) యొక్క మనుగడను క్యాప్టాన్ గణనీయంగా తగ్గించిందని చూపించారు.అదనంగా, క్యాప్టాన్ మరియు బోస్కాలిడ్ వంటి శిలీంద్రనాశకాలు లార్వా మరణాలకు 52,53,54 కారణమవుతాయని లేదా దాణా ప్రవర్తనను మారుస్తాయని కనుగొనబడింది.ఈ మార్పులు, పుప్పొడి యొక్క పోషక నాణ్యతను ప్రభావితం చేస్తాయి మరియు చివరికి లార్వా దశ యొక్క శక్తిని పొందుతాయి.నియంత్రణ సమూహంలో గమనించిన మరణాలు ఇతర అధ్యయనాలకు అనుగుణంగా ఉన్నాయి 56,57.
మా పనిలో గమనించిన మగ-అనుకూల లింగ నిష్పత్తి, విసెన్స్ మరియు బాష్ ద్వారా O. కార్నూటా కోసం గతంలో సూచించినట్లుగా, పుష్పించే సమయంలో తగినంత సంభోగం మరియు పేలవమైన వాతావరణ పరిస్థితులు వంటి అంశాల ద్వారా వివరించబడవచ్చు.మా అధ్యయనంలో ఆడవారు మరియు మగవారు జతకట్టడానికి నాలుగు రోజుల సమయం ఉన్నప్పటికీ (సాధారణంగా విజయవంతమైన సంభోగానికి సరిపోతుందని భావిస్తారు), ఒత్తిడిని తగ్గించడానికి మేము ఉద్దేశపూర్వకంగా కాంతి తీవ్రతను తగ్గించాము.అయితే, ఈ సవరణ అనుకోకుండా సంభోగం ప్రక్రియలో జోక్యం చేసుకోవచ్చు.అదనంగా, తేనెటీగలు వర్షం మరియు తక్కువ ఉష్ణోగ్రతలు (<5°C)తో సహా అనేక రోజుల ప్రతికూల వాతావరణాన్ని అనుభవిస్తాయి, ఇవి సంభోగం విజయాన్ని ప్రతికూలంగా ప్రభావితం చేస్తాయి4,23.
మా అధ్యయనం మొత్తం లార్వా మైక్రోబయోమ్‌పై దృష్టి కేంద్రీకరించినప్పటికీ, మా ఫలితాలు తేనెటీగ పోషణ మరియు శిలీంద్ర సంహారిణి బహిర్గతం కోసం కీలకమైన బ్యాక్టీరియా సంఘాల మధ్య సంభావ్య సంబంధాలపై అంతర్దృష్టిని అందిస్తాయి.ఉదాహరణకు, లార్వా తినిపించిన మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన పుప్పొడి, చికిత్స చేయని పుప్పొడిని తినిపించిన లార్వాతో పోలిస్తే సూక్ష్మజీవుల సంఘం నిర్మాణం మరియు సమృద్ధిని గణనీయంగా తగ్గించింది.చికిత్స చేయని పుప్పొడిని తినే లార్వాలో, ప్రోటీబాక్టీరియా మరియు ఆక్టినోబాక్టీరియా అనే బ్యాక్టీరియా సమూహాలు ప్రబలంగా ఉంటాయి మరియు ప్రధానంగా ఏరోబిక్ లేదా ఫ్యాకల్టేటివ్‌గా ఏరోబిక్‌గా ఉంటాయి.డెల్ఫ్ట్ బ్యాక్టీరియా, సాధారణంగా ఒంటరి తేనెటీగ జాతులతో సంబంధం కలిగి ఉంటుంది, ఇది యాంటీబయాటిక్ చర్యను కలిగి ఉంటుంది, ఇది వ్యాధికారక క్రిములకు వ్యతిరేకంగా సంభావ్య రక్షణ పాత్రను సూచిస్తుంది.మరొక బాక్టీరియా జాతి, సూడోమోనాస్, చికిత్స చేయని పుప్పొడిని తినిపించిన లార్వాలో సమృద్ధిగా ఉంటుంది, కానీ మాంకోజెబ్-చికిత్స చేసిన లార్వాలో గణనీయంగా తగ్గింది.మా ఫలితాలు O. bicornis35 మరియు ఇతర ఒంటరి కందిరీగలలో అత్యంత సమృద్ధిగా ఉన్న జాతులలో ఒకటిగా సూడోమోనాస్‌ను గుర్తించే మునుపటి అధ్యయనాలకు మద్దతునిస్తాయి.O. కార్నిఫ్రాన్స్ ఆరోగ్యంలో సూడోమోనాస్ పాత్రకు సంబంధించిన ప్రయోగాత్మక ఆధారాలు అధ్యయనం చేయనప్పటికీ, ఈ బాక్టీరియం బీటిల్ Paederus ఫ్యూసిప్స్‌లోని రక్షిత టాక్సిన్స్ సంశ్లేషణను ప్రోత్సహిస్తుంది మరియు విట్రో 35, 65లో అర్జినైన్ జీవక్రియను ప్రోత్సహిస్తుంది. ఈ పరిశీలనలు సూచిస్తున్నాయి. O. కార్నిఫ్రాన్స్ లార్వా అభివృద్ధి సమయంలో వైరల్ మరియు బ్యాక్టీరియా రక్షణలో సంభావ్య పాత్ర.మైక్రోబాక్టీరియం అనేది మా అధ్యయనంలో గుర్తించబడిన మరొక జాతి, ఇది ఆకలితో ఉన్న పరిస్థితుల్లో నల్ల సైనికుల ఫ్లై లార్వాలో అధిక సంఖ్యలో ఉన్నట్లు నివేదించబడింది.O. కార్నిఫ్రాన్స్ లార్వాలో, మైక్రోబ్యాక్టీరియా ఒత్తిడి పరిస్థితులలో గట్ మైక్రోబయోమ్ యొక్క సమతుల్యత మరియు స్థితిస్థాపకతకు దోహదం చేస్తుంది.అదనంగా, రోడోకాకస్ O. కార్నిఫ్రాన్స్ లార్వాలో కనుగొనబడింది మరియు దాని నిర్విషీకరణ సామర్థ్యాలకు ప్రసిద్ధి చెందింది.ఈ జాతి A. ఫ్లోరియా యొక్క గట్‌లో కూడా కనిపిస్తుంది, కానీ చాలా తక్కువ సమృద్ధి68.మా ఫలితాలు లార్వాలో జీవక్రియ ప్రక్రియలను మార్చగల అనేక సూక్ష్మజీవుల టాక్సాలో బహుళ జన్యు వైవిధ్యాల ఉనికిని ప్రదర్శిస్తాయి.అయినప్పటికీ, O. కార్నిఫ్రాన్స్ యొక్క క్రియాత్మక వైవిధ్యం గురించి మంచి అవగాహన అవసరం.
సారాంశంలో, ఫలితాలు మాంకోజెబ్, పైరిథియోస్ట్రోబిన్ మరియు ట్రిఫ్లోక్సిస్ట్రోబిన్ శరీర బరువును తగ్గించాయని మరియు మొక్కజొన్న బోరర్ లార్వాల మరణాలను పెంచాయని సూచిస్తున్నాయి.పరాగ సంపర్కాలపై శిలీంద్ర సంహారిణుల ప్రభావాల గురించి ఆందోళన చెందుతున్నప్పటికీ, ఈ సమ్మేళనాల అవశేష జీవక్రియల ప్రభావాలను బాగా అర్థం చేసుకోవడం అవసరం.ఈ ఫలితాలను సమీకృత పరాగ సంపర్క నిర్వహణ ప్రోగ్రామ్‌ల సిఫార్సులలో చేర్చవచ్చు, ఇవి పండ్ల చెట్టు పుష్పించే ముందు మరియు సమయంలో ఫంగైసైడ్‌లను ఎంచుకోవడం ద్వారా మరియు అప్లికేషన్ యొక్క సమయాన్ని మార్చడం ద్వారా లేదా తక్కువ హానికరమైన ప్రత్యామ్నాయాల వినియోగాన్ని ప్రోత్సహించడం ద్వారా రైతులకు కొన్ని శిలీంద్రనాశకాల వాడకాన్ని నివారించడంలో సహాయపడతాయి 36. ఈ సమాచారం సిఫార్సులను అభివృద్ధి చేయడం ముఖ్యం.పురుగుమందుల వాడకంపై, ఇప్పటికే ఉన్న స్ప్రే ప్రోగ్రామ్‌లను సర్దుబాటు చేయడం మరియు శిలీంద్రనాశకాలను ఎంచుకునేటప్పుడు పిచికారీ సమయాన్ని మార్చడం లేదా తక్కువ ప్రమాదకర ప్రత్యామ్నాయాల వినియోగాన్ని ప్రోత్సహించడం వంటివి.లింగ నిష్పత్తి, తినే ప్రవర్తన, గట్ మైక్రోబయోమ్ మరియు మొక్కజొన్న బోరర్ బరువు తగ్గడం మరియు మరణాల అంతర్లీనంగా ఉండే పరమాణు విధానాలపై శిలీంద్రనాశకాల యొక్క ప్రతికూల ప్రభావాలపై మరింత పరిశోధన అవసరం.
గణాంకాలు 1 మరియు 2లోని సోర్స్ డేటా 1, 2 మరియు 3 ఫిగ్‌షేర్ డేటా రిపోజిటరీ DOIలో జమ చేయబడ్డాయి: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 మరియు https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233.ప్రస్తుత అధ్యయనంలో విశ్లేషించబడిన సీక్వెన్సులు (Fig. 4, 5) NCBI SRA రిపోజిటరీలో ప్రవేశ సంఖ్య PRJNA1023565 క్రింద అందుబాటులో ఉన్నాయి.
బాష్, J. మరియు కెంప్, WP వ్యవసాయ పంటల పరాగ సంపర్కాలుగా తేనెటీగ జాతుల అభివృద్ధి మరియు స్థాపన: ఓస్మియా జాతికి ఉదాహరణ.(హైమెనోప్టెరా: మెగాచిలిడే) మరియు పండ్ల చెట్లు.ఎద్దు.న్టోమోర్.వనరు.92, 3–16 (2002).
పార్కర్, MG మరియు ఇతరులు.న్యూయార్క్ మరియు పెన్సిల్వేనియాలో ఆపిల్ పెంపకందారులలో పరాగసంపర్క పద్ధతులు మరియు ప్రత్యామ్నాయ పరాగ సంపర్కాల యొక్క అవగాహన.నవీకరణ.వ్యవసాయం.ఆహార వ్యవస్థలు.35, 1–14 (2020).
కోచ్ I., లాన్స్‌డోర్ఫ్ EW, ఆర్ట్జ్ DR, పిట్స్-సింగర్ TL మరియు రికెట్స్ TH ఎకాలజీ మరియు స్థానిక తేనెటీగలను ఉపయోగించి బాదం పరాగసంపర్కం యొక్క ఆర్థికశాస్త్రం.J. ఎకనామిక్స్.న్టోమోర్.111, 16–25 (2018).
లీ, ఇ., హీ, వై., మరియు పార్క్, వై.-ఎల్.ట్రాగోపాన్ ఫినాలజీపై వాతావరణ మార్పు యొక్క ప్రభావాలు: జనాభా నిర్వహణకు చిక్కులు.ఎక్కడం.150, 305–317 (2018) మార్చండి.
ఆర్ట్జ్, DR మరియు పిట్స్-సింగర్, TL శిలీంద్ర సంహారిణి మరియు సహాయక స్ప్రేలు రెండు నిర్వహించబడే ఒంటరి తేనెటీగలు (ఓస్మియా లిగ్నేరియా మరియు మెగాచిలే రోటుండాటా) గూడు ప్రవర్తనపై ప్రభావం చూపుతాయి.PloS One 10, e0135688 (2015).
బ్యూవైస్, S. మరియు ఇతరులు.తక్కువ విషపూరిత పంట శిలీంద్ర సంహారిణి (ఫెన్‌బుకోనజోల్) మగ పునరుత్పత్తి నాణ్యత సంకేతాలకు ఆటంకం కలిగిస్తుంది, ఫలితంగా అడవి ఒంటరి తేనెటీగలలో సంభోగం విజయం తగ్గుతుంది.J. యాప్స్.జీవావరణ శాస్త్రం.59, 1596–1607 (2022).
స్గోలాస్ట్రా F. మరియు ఇతరులు.నియోనికోటినాయిడ్ క్రిమిసంహారకాలు మరియు ఎర్గోస్టెరాల్ బయోసింథసిస్ మూడు తేనెటీగ జాతులలో సినర్జిస్టిక్ శిలీంద్ర సంహారిణి మరణాలను అణిచివేస్తాయి.తెగులు నియంత్రణ.శాస్త్రం.73, 1236–1243 (2017).
కుహ్నేమాన్ JG, గిల్లంగ్ J, వాన్ డైక్ MT, ఫోర్డైస్ RF.మరియు డాన్‌ఫోర్త్ BN సోలిటరీ కందిరీగ లార్వా కాండం-గూడు కట్టుకునే తేనెటీగలు ఓస్మియా కార్నిఫ్రాన్స్ (మెగాచిలిడే)కు పుప్పొడి ద్వారా అందించబడే బ్యాక్టీరియా వైవిధ్యాన్ని మారుస్తుంది.ముందు.సూక్ష్మజీవి.13, 1057626 (2023).
ధరంపాల్ PS, డాన్‌ఫోర్త్ BN మరియు స్టెఫాన్ SA పులియబెట్టిన పుప్పొడిలోని ఎక్టోసింబియోటిక్ సూక్ష్మజీవులు ఒంటరి తేనెటీగల అభివృద్ధికి పుప్పొడి వలె ముఖ్యమైనవి.జీవావరణ శాస్త్రం.పరిణామం.12. e8788 (2022).
Kelderer M, Manici LM, Caputo F మరియు Thalheimer M. రీసీడింగ్ వ్యాధులను నియంత్రించడానికి ఆపిల్ తోటలలో ఇంటర్-వరుస నాటడం: సూక్ష్మజీవుల సూచికల ఆధారంగా ఒక ఆచరణాత్మక ప్రభావ అధ్యయనం.మొక్కల నేల 357, 381–393 (2012).
మార్టిన్ PL, Kravchik T., ఖోడదాడి F., Achimovich SG మరియు పీటర్ KA మధ్య అట్లాంటిక్ యునైటెడ్ స్టేట్స్‌లో ఆపిల్ యొక్క చేదు తెగులు: కారణ జాతుల అంచనా మరియు ప్రాంతీయ వాతావరణ పరిస్థితులు మరియు సాగు గ్రహణశీలత ప్రభావం.ఫైటోపాథాలజీ 111, 966–981 (2021).
కల్లెన్ MG, థాంప్సన్ LJ, కరోలన్ JK, స్టౌట్ JK.మరియు స్టాన్లీ DA శిలీంద్రనాశకాలు, కలుపు సంహారకాలు మరియు తేనెటీగలు: ఇప్పటికే ఉన్న పరిశోధన మరియు పద్ధతుల యొక్క క్రమబద్ధమైన సమీక్ష.PLoS One 14, e0225743 (2019).
పిల్లింగ్, ED మరియు జెప్సన్, తేనెటీగలు (అపిస్ మెల్లిఫెరా) పై EBI శిలీంద్రనాశకాలు మరియు పైరెథ్రాయిడ్ పురుగుమందుల యొక్క PC సినర్జిస్టిక్ ప్రభావాలు.శాస్త్రానికి చీడపీడలు వేస్తుంది.39, 293–297 (1993).
ముస్సెన్, EC, లోపెజ్, JE మరియు పెంగ్, CY తేనెటీగ లార్వా అపిస్ మెల్లిఫెరా L. (హైమెనోప్టెరా: అపిడే) పెరుగుదల మరియు అభివృద్ధిపై ఎంచుకున్న శిలీంద్రనాశకాల ప్రభావం.బుధవారం.న్టోమోర్.33, 1151-1154 (2004).
వాన్ డైక్, M., ముల్లెన్, E., విక్‌స్టెడ్, D., మరియు మెక్‌ఆర్ట్, S. చెట్ల తోటలలో పరాగ సంపర్కాలను రక్షించడానికి పురుగుమందుల ఉపయోగం కోసం డెసిషన్ గైడ్ (కార్నెల్ విశ్వవిద్యాలయం, 2018).
ఇవాసాకి, JM మరియు హోగెన్‌డోర్న్, K. నాన్‌పెస్టిసైడ్‌లకు తేనెటీగలను బహిర్గతం చేయడం: పద్ధతులు మరియు నివేదించబడిన ఫలితాల సమీక్ష.వ్యవసాయం.పర్యావరణ వ్యవస్థ.బుధవారం.314, 107423 (2021).
కోపిట్ AM, క్లింగర్ E, కాక్స్-ఫోస్టర్ DL, రామిరేజ్ RA.మరియు పిట్స్-సింగర్ TL ఓస్మియా లిగ్నేరియా (హైమెనోప్టెరా: మెగాచిలిడే) లార్వా అభివృద్ధిపై సరఫరా రకం మరియు పురుగుమందుల బహిర్గతం ప్రభావం.బుధవారం.న్టోమోర్.51, 240–251 (2022).
కోపిట్ AM మరియు పిట్స్-సింగర్ TL ఒంటరి ఖాళీ-గూడు తేనెటీగలకు పురుగుమందుల బహిర్గతం యొక్క మార్గాలు.బుధవారం.న్టోమోర్.47, 499–510 (2018).
పాన్, NT మరియు ఇతరులు.వయోజన జపనీస్ గార్డెన్ బీస్ (ఓస్మియా కార్నిఫ్రాన్స్)లో పురుగుమందుల విషాన్ని అంచనా వేయడానికి కొత్త ఇంజెషన్ బయోఅస్సే ప్రోటోకాల్.శాస్త్రం.నివేదికలు 10, 9517 (2020).